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乳鼠心肌细胞
南京奥青生物技术有限公司--Angle Gene Technologies / 2016-10-11

主要操作规程

(一)   (一) 试剂配制

1D-Hanks液(g/L;KCL 0.40KH2P04 0.06NaCI 8.00NaKCO3 0.35Na2HP04.12H20  0.13,酚红0.02。以1mol/L HCI1mol/L 调整溶液PH值至7.0-7.2,每瓶100mL分装,4℃冷藏备用。

20.125%胰蛋白酶;0.125g胰蛋白酶干粉溶于100Ml D-Hanks液中,搅拌2h4℃冰箱放置过夜,每瓶8ml 分装 -20℃冷藏备用。

3DMEM 培养基:DMEM 干粉(1L量)溶于500ml三蒸水中,充分搅拌溶解,将3.0gNaHC03溶于少量三蒸水中,混合,定容至1L后调PH值至6.8-7.0,每瓶80ml分装,4℃冷藏备用。

4、双抗氧液配制:100U硫酸链霉素溶于10mL Hanks液中,80U青霉素粉溶于8mL 上述硫酸链霉素的Hanks液中,配成每毫升含青霉素、链霉素各10U的母液。使用时,在100mL培养基中加母液0.1ml,则培养基内青霉素、链霉素终浓度为1000U/mL

5、胎牛血清,胎牛血清在56℃水浴中灭活30min,青霉素小瓶分装,-20保存备用。将20ml太牛学清加入80ml DEME中,配成终浓度为含20%胎牛血清的DEME

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